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全新的安捷伦生物色谱柱分析 mAb 时具有更快的速度、分离度、回收率、效率和重现性

作者：Wu Chen
安捷伦研发高级化学家

Anne Mack
Agilent BioHPLC 应用化学家

及 Stephen Luke
安捷伦液相色谱柱产品经理

单克隆抗体 (mAb) 治疗药物是今年的几个重磅新闻之一，其中最著名的是使用实验性的 ZMapp 三抗体混合物创建对埃博拉病毒外侧糖标记蛋白的人工免疫应答。

高效液相色谱 (HPLC) 及超高效液相色谱 (UHPLC) 系统常用于 mAb 的生物制药发现及开发。为了推动这一重要领域的进步，安捷伦开发了一系列新的 AdvanceBio RP-mAb 液相色谱柱，设计用于完整及还原态单克隆抗体的快速、高分离度、高回收率及高效分离和分析。

AdvanceBio RP-mAb 色谱柱基于 Agilent Poroshell 技术，填充表面多孔的 3.5 µm 硅胶颗粒，孔径为 450Å，这是用于蛋白及 mAb 分离的目前最大孔径的表面多孔颗粒。0.25 µm 的多孔层是一步成形的，而非多层处理，因此可提供高度均一的颗粒，且批次间重现性优异。这种特殊颗粒是专为完整及还原态单克隆抗体的反相分离所设计的，具有 StableBond C8、C4 和二苯基键合化学组成，可提供高分离度。

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图 1. 采用 Agilent AdvanceBio RP-mAb C4 色谱柱（2.1 x 100 mm，3.5 µm），实现 IgG2 更高分离度的分离

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图 2. 与全多孔的 300Ǻ 色谱柱相比，AdvanceBio RP-mAb 色谱柱可提供更高、更尖锐、分离度更好的色谱峰

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图 3. Agilent AdvanceBio RP-mAb C4、SB-C8 及二苯基固定相色谱柱可提供不同的选择性（分析条件与表 1 相同）

更高的分离度，同时获取更高、更尖锐、分离度更好的色谱峰

与其他供应商设计的用于蛋分离的色谱柱相比，Agilent AdvanceBio RP-mAb 色谱柱可提供更高的分离度，正如图 1 所示。

此外，我们的研究还证明了相比全多孔的 300Å 色谱柱，AdvanceBio RP-mAb 色谱柱可获得更多的详细信息。图 2 表明了与全多孔的 300Å 色谱柱相比，AdvanceBio RP-mAb 色谱柱可获取更高、高尖锐、分离度更高的色谱峰。

出色的重现性

Agilent Poroshell 生产工艺可获得高重现性的颗粒。由表 1 可知，在十个不同的介质批次间，Agilent AdvanceBio RP-mAb 3.5 µm C4 色谱柱的蛋白分离性能高度一致。其中保留时间和峰宽在这些色谱柱间重现性极高，%RSD 分别小于 1.5% 和 7.0%。

表 1. 十个不同批次的 Agilent AdvanceBio RP-mAb 3.5 µm C4 色谱柱进行蛋白分析的 %RSD 结果

选择性选项

AdvanceBio RP-mAb 系列的色谱柱有三种固定相，每种都有不同的选择性，您可在方法开发时灵活选用以确保为您的应用获得最高的分离度。图 3 展示了键合相的选择对分离的影响。

稳定且高质量的 HPLC 及 UHPLC 解决方案

AdvanceBio RP-mAb 是安捷伦不断增长的高质量 AdvanceBio 色谱柱系列的最新产品，可用于 HPLC 及 UHPLC 表征单克隆抗体。从样品纯化至分析，安捷伦生物分子色谱柱可以很容易地与您的工作流程集成，为您提供完整、可重现的解决方案。

安捷伦拥有一系列稳定的先进产品，可满足您所有的液相色谱需求。其中包括配有非金属样品流路的 Agilent 1260 Infinity 生物惰性液相色谱系统，以及为 UHPLC 应用提供最高的速度、分离度和超高灵敏度的 Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统。虽然生物分子非常复杂，但使用 Agilent HPLC 色谱柱、系统和备件可简单、轻松地实现其结构分析。现在请花一点时间了解这些生物制药解决方案。然后利用我们海量的生物制药资源，使您在 mAb 的生物制药发现及开发方面的投资实现价值最大化。

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