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Access Agilent 电子期刊(2016 年 1 月)

咨询专家:我能否在旧 HPLC 系统上改善碱性化合物的色谱分析结果?

Stephen Luke,安捷伦产品经理

为了解答这一问题,我们的专家讨论了各种 Agilent Poroshell 120 4 µm 色谱柱、它们的应用以及它们如何能够帮助色谱工作者使用较长的色谱柱规格(如 4.6 × 250 mm)或将系统压力控制在 200 bar (3000 psi) 以下。

问题:在旧 HPLC 系统上使用填料为表面多孔颗粒的色谱柱有优势吗?

答案:填料为 Agilent Poroshell 120 表面多孔硅胶颗粒的色谱柱相比于填料为全多孔颗粒的色谱柱具有众多优势。这些优势包括分析时间更快,以及在适当的压力下具有高柱效,从而能够实现更高的分离度。

问题:高 pH 流动相的优缺点是什么?

答案:碱性化合物(例如许多药物)难以通过反相 HPLC 进行分析,因为它们在流动相中容易发生离子化。这种离子化可能导致保留性能、峰形、分离度和上样容量下降。提高流动相的 pH 是抑制碱性化合物离子化的有效途径。然而,该方法可能影响色谱柱使用寿命,因为硅胶柱填料在 pH 高于 7-8 的流动相中会发生溶解。

问题:有没有稳定性高且降解率低的分析解决方案?

答案:有。安捷伦开发了专利的表面多孔硅胶颗粒表面有机修饰技术,并推出了 Agilent Poroshell HPH-C18 和 HPH-C8 色谱柱,这两款色谱柱能够在 pH 3.0 至 11.0 的范围内保持稳定。此前这些色谱柱仅提供 2.7 µm 填料粒径,现在还提供 4 µm 填料粒径。

图 1. Agilent Poroshell HPH-C18 2.1 × 50 mm, 4 µm 色谱柱能够在 pH = 10 的条件下使碱性化合物获得优异的色谱分析结果并且具有良好的稳定性

问题:我能够获得怎样的结果?

答案:图 1 中,我们的结果表明使用 Poroshell HPH-C18 2.1 × 50 mm, 4 µm 色谱柱能够在 pH =10 的流动相条件下使碱性化合物获得优异的色谱分析结果。此外,经过 2000 多次进样后,色谱性能并未出现下降。

Agilent Poroshell HPH-C18 和 Poroshell HPH-C8 4 µm 色谱柱均具有分析时间更快、分离度更高以及能够使碱性化合物获得优异的色谱分析结果的综合优势,并适用于所有 HPLC 用户。

Agilent Poroshell 120 解决方案能够实现更快的分析时间和更高的分离度

Poroshell 120 色谱柱可在任何主流液相色谱系统的压力范围内实现稳定的高分离度分离。安捷伦提供 2.7 µm 和 4 µm 填料粒径及包括十二种固定相的系列产品(与 ZORBAX 固定相一致),可帮助您灵活、轻松地实现方法开发和转移。

此外,安捷伦的 Poroshell 液相色谱柱系列产品均由安捷伦按照最严苛的 QC 标准(包括多项 QC 测试和色谱测试)设计和生产。这可确保色谱柱工作者获得高可靠性、高重现的长寿命色谱柱。现在请观看该视频以了解安捷伦如何使其 Poroshell 和 ZORBAX 产品实现良好的一致性。然后请访问我们的网站以了解有关 Agilent Poroshell 解决方案的更多信息。

Figure 1

峰号

  1. 2-羟基-5-甲基苯甲醛
  2. 4-氯肉桂酸
  3. 苯乙酮
  1. 硫酸奎宁
  2. 去甲替林
  1. 苯己酮
  2. 阿米替林
分析条件
色谱柱 Poroshell HPH-C18 柱,2.1 × 50 mm,4 µm
流动相 A:乙腈;B:碳酸氢铵,10 mM,pH 10
梯度
时间 (s) %B
0 5
5.1 95
5.1 5
7 5
温度 25 ℃
流速 0.4 mL/min
检测器 UV,220 nm,4 nm,参比波长关闭
系统 带 PEEK 转子密封垫的 Agilent 1290 Infinity LC

Agilent Poroshell HPH-C18 2.1 × 50 mm, 4 µm 色谱柱能够在 pH = 10 的条件下使碱性化合物获得优异的色谱分析结果并且具有良好的稳定性