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Access Agilent 电子期刊（2015 年 6 月）

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安捷伦的全新真菌毒素 PCDL 能实现快速、简便的筛查和定量分析

作者：John Lee
安捷伦市场部食品行业经理

真菌毒素是真菌的次级代谢物，存在于多种食物和动物饲料中。它们中有的非常危险，甚至可以致癌。尽管监管手段已经覆盖了目前我们最为了解的几种真菌毒素，但对多种真菌毒素监测的关注依然在不断上升。由于 Q-TOF 质谱可进行高选择性全扫描分析，并且可以确定精确质量，因此提供了拓展这类监测手段的新的可能性。

真菌毒素筛查为分析人员带来了挑战

通过全扫描数据确定精确质量是一种高效的策略，可以搜索更多的化合物，但在处理复杂样品的时候，可能会误查到无害的基质化合物。这种情况在搜索的条目数量增加时尤为明显。

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图 1. MassHunter PCDL Manager 软件可在碰撞能量为 10 eV 时提供 [M+NH4]+ 类 T-2 毒素的精确质量谱图

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图 2. (A) 加标玉米样品中曲霉酰亚胺的母离子谱图和碎片离子谱图的全离子叠加谱图；(B) 共流出图；(C) 化合物鉴定结果（包括共流出得分）

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图 3. 从天然受污染的榛子样品中检测出的真菌毒素谱图。(A) brevianamid F（低于定量下限）、(B) 交链孢酚 (310 µg/kg)、(C) 霉酚酸 (6100 µg/kg)、(D) 玉米烯酮 (21 µg/kg)、(E) 交链孢酚单甲醚 (220 µg/kg) 和 (F) 巨孢子素 (520 µg/kg)

真菌毒素个人化合物数据库和谱库 (PCDL) 如何解决这个问题？

  • 快速将 Q-TOF 转变为真菌毒素筛查器。你无需再确定要搜索哪些化合物，也无需再建立个人谱库。新的 PCDL 中含有 450 多种化合物，包括与食物或环境中发现的霉菌相关的真菌毒素、真菌代谢物和细菌代谢物。真菌毒素 PCDL 包含 302 种记录了精确质谱的化合物，并有 1360 多份精确质谱数据用于鉴定。
  • 高效而简单地鉴定。真菌毒素 PCDL 已加载到 Agilent MassHunter 工作站，成为了搜索过程的重要部分。只需运行样品并按搜索 (SEARCH) 键即可。
  • 筛查与定量同步进行。当您为较为常见的化合物添加了校准数据之后，定量程序会自动加入到筛查过程中。无论你使用的是全离子采集或者全 MS/MS，Agilent 6550 iFunnel Q-TOF LC/MS 都能在生成用于定量的连续高分离度色谱数据的同时，快速收集用于验证的谱图信息。

安捷伦解决方案能够为建立全面的真菌毒素数据库提供帮助

三种碰撞能量下的靶向 MS/MS 模式中单一分析物解决方案的精确质量谱图，采集了所有相关的分子离子，包括（[M+H]+、[M-H]-、[M+NH4]+ 和 [M+CHOO]-）。这项数据的采集由维也纳附近的 IFA Tulln 学院分析化学系完成，是由该实验室近十年来整理的分离菌株和标准菌株的数据汇总而成。之后安捷伦对这些化合物和谱图数据进行了标注和验证。

将 MS/MS 质谱的离子和理论碎片分子式进行比较，并用理论质量进行校正。质谱噪音滤波器和最小基峰阈值也运用其中，以确保所有的碎片离子都能获得良好的离子统计数据。图 1 展示了所得真菌毒素 PCDL 中的一个条目。

用于同步筛查和验证的全离子 MS/MS 采集

使用全离子 MS/MS 工作流程分析食物样品时，利用真菌毒素 PCDL 中的谱图信息，将母离子（低能量通道）和碎片离子（高能量通道）的色谱图进行叠加。共流出得分（用于衡量碎片离子和母离子共流出的得分）将用于验证匹配到的结果。如图 2A 所示。这个示例中使用了加标玉米样品，7 张碎片离子色谱图展示了与母离子的共流出数据，获得了较高的分数。

实例：检测榛子中的真菌代谢污染物

全离子 MS/MS 数据的母离子和碎片离子信息还可以通过 Agilent MassHunter 的化合物概览 (Compounds-at-a-Glance) 功能查看，并且还可以在这里汇报浓度值或者和校准值进行比较。图 3 中展示了 IFA Tulln 最近从一个榛子样品中发现的六种自然产生的污染物。

可用于真菌毒素检测和其他应用的安捷伦解决方案

欲了解本次真菌毒素筛查案例的详细信息，请查阅安捷伦出版物 5991-5667EN。其他安捷伦 PCDL 解决方案包括农药、兽药以及法医和毒理学应用所使用的 Q-TOF。

安捷伦还有多种可帮助您检测和鉴定食品中生物毒素的解决方案。了解我们适用于您工作流程每一步的样品前处理、色谱柱与备件产品组合。此外，安捷伦还能为繁忙的实验室提供各种液相色谱和质谱解决方案。即刻联系安捷伦客户服务中心，了解安捷伦液相色谱和质谱解决方案是如何实现高通量、低成本和高准确性的。

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图 1.

MassHunter PCDL Manager 软件可在碰撞能量为 10 eV 时提供 [M+NH4]+ 类 T-2 毒素的精确质量谱图

图 2.

(A) 加标玉米样品中曲霉酰亚胺的母离子谱图和碎片离子谱图的全离子叠加谱图；(B) 共流出图；(C) 化合物鉴定结果（包括共流出得分）

图 3.

从天然受污染的榛子样品中检测出的真菌毒素谱图。(A) brevianamid F（低于定量下限）、(B) 交链孢酚 (310 µg/kg)、(C) 霉酚酸 (6100 µg/kg)、(D) 玉米烯酮 (21 µg/kg)、(E) 交链孢酚单甲醚 (220 µg/kg) 和 (F) 巨孢子素 (520 µg/kg)