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Access Agilent 电子期刊,2015 年 11 月

在体积小巧的 Agilent 1290 Infinity II 单机架中进行高级液相色谱方法开发

作者:Anneke Muehlebach
安捷伦分析型液相色谱全球产品经理

液相色谱方法开发相当费时,必须对各种色谱柱、溶剂和温度进行测试,从中找出最佳分离条件。自动化的液相色谱系统加快了方法开发的速度,但通常要设置两套机架配置,占据了宝贵的台面空间。现在,我们有了 Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统,可以用比过去更少的模块进行高级液相色谱方法开发:体积小巧的单机架(图 1)节省了台面空间,可以测试 1000 多种不同分离条件。用新版的安捷伦方法筛选向导,这些条件都可以很方便地实现。

图 1. 单机架的 Agilent 1200 Infinity 系列方法开发解决方案高效地利用台面空间

图 2. Agilent 1290 Infinity II 多柱恒温箱,配置了 8 柱选择阀和 Agilent A-Line Quick Connect 接头,用于快速、无障碍的色谱柱更换

快速、直接的方法开发

超高效液相色谱 (UHPLC) 作为药理学和化学中的一项重要分析技术,能够高效地分离各种化合物。由于化合物的分离取决于待测分子与固定相和流动相之间的相互作用,因此确定最佳分离条件可能是一项相当艰巨的任务。溶剂类型、色谱柱类型、温度和梯度组成等关键参数的各种可能组合几乎无穷无尽。凭借 Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系列高级的硬件和软件,Agilent 1200 Infinity 系列方法开发解决方案简化并加快了序列生成,此序列可系统地改变所有关键方法参数。

Agilent 1290 Infinity II 多柱恒温箱 (MCT) 是方法开发解决方案中优化方法开发效率的核心模块。现在一个 MCT 可以提供多达 8 根色谱柱的容量,各带低扩散热交换器,可以进行柱前溶剂加热(图 2)。这种热交换器可以在 4 °C(约低于室温 20 °C)到 110 °C之间宽泛的温度范围内对溶剂进行冷却或加热。使用 Agilent A-Line Quick-Connect 接头可以快速更换色谱柱。可在高温下成功完成热不稳定化合物分析、温度敏感性手性分离,或快速色谱等挑战性应用。

轻松测试 8 根色谱柱,优化分离

耐压高达 1300 bar 的安捷伦 8 柱选择阀让您无需进行重新连接,即可在多达 8 根色谱柱之间进行选择。与以前的柱温箱相比,Agilent 1290 Infinity II MCT 装了一个灵活的门板。打开至 90° 时,可以将门作为一个“小桌”,不用“第三只手”即可方便地进行色谱柱安装。为了便于操作,还可以将门打开到180°,或者干脆完全拿掉。

采用安捷伦方法筛选向导轻松设置序列

安捷伦方法筛选向导 (MSW) 是一款 Agilent OpenLAB CDS ChemStation 版的软件插件。MSW 可帮助您设置方法和序列,通过采用 Agilent 1200 Infinity 系列方法开发解决方案轻松而符合逻辑地进行方法筛选。形成一个包含可用色谱柱、溶剂、预设梯度和预设温度等所有可能组合的序列。方法筛选向导自动生成所有步骤,包括用任何需要的溶剂冲洗系统,完成色谱柱平衡步骤,并可以将色谱柱保存在任何预设的保存溶剂中。它智能化地利用废液和/或旁路管线,完成快速冲洗步骤。为了节省宝贵的时间和溶剂,还可以设置需要最少步骤的工作流程。

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图 3. 紫外色谱图显示了测试混合物的分离。为了确定最佳分离条件,我们对 7 种不同固定相和流动相进行了自动化研究

用实例说明方法开发的速度

为了进行方法筛选,我们用 7 根 50 mm 长(2.1 mm 内径,1.8 µm 粒径)的色谱柱,与 3 种水性和 4 种有机流动相进行组合。当需要更换溶剂时,我们用一位色谱柱选择阀作为旁路,快速冲洗系统。此外,我们还对 30、40、50 和 60 °C 进行了温度筛选。在整个过程中,使用了一般梯度。我们用安捷伦方法筛选向导建立了一个序列,包含了共 166 次进样,以及相应的冲洗和平衡。这套灵活的系统快速确定了复杂样品的最佳分离条件。

选择与您需求相匹配的液相色谱解决方案

安捷伦为几乎所有的液相色谱应用提供了各种工具和解决方案。无论您是需要提高样品通量、加快方法开发速度、实现自动化样品前处理,还是要解决具有挑战性的应用问题,安捷伦高度模块化的方法都能为您提供成功所需的灵活性。如需了解更多信息,请联系安捷伦客户服务中心,帮助您根据应用确定正确的工具。

参考文献

  1. “Automated Scouting of Stationary and Mobile Phases Using the Agilent 1200 Infinity Series Method Development Solution”(采用 Agilent 1200 Infinity 系列方法开发解决方案自动筛选固定相和流动相),应用简报 5991-5934EN,2015。
  2. “Performance Characteristics of the Agilent 1290 Infinity II Multicolumn Thermostat”(Agilent 1290 Infinity II 多柱恒温箱的性能特征),技术概述 5991-5533EN,2015。

图 3.

紫外色谱图显示了测试混合物的分离。为了确定最佳分离条件,我们对 7 种不同固定相和流动相进行了自动化研究