Seahorse XF ATP
생성률 측정은 엔드포인트 총 ATP 레벨 분석을 넘어 세포 활동에 관해 차원이 다른 심층적 정보를 제공합니다.
두 에너지 생성 경로를 동시에 정량화하여 관련 전환 데이터 제공
차원이 다른 ATP 생성률 측정
세포의 총 ATP 레벨을 측정하면 상황을 어느 정도는 알 수 있습니다. 그러나 생성률 또는 경로 기여도에 대한 관점이 없으면 세포 증식, 분화, 활성화 및 사멸에 대한 중요한 정보를 놓칠 수 있습니다.
Agilent Seahorse XF 실시간 ATP 생성률 실험을 통해 중요한 요소를 측정할 수 있습니다. 무표지 기술을 이용하여 생세포에서 두 가지 주요 에너지 경로(당분해 및 미토콘드리아 호흡)의 ATP 생성률을 동시에 측정할 수 있는 길이 열렸습니다. 실시간 이중 경로 동역학 정량화로서 기존의 엔드포인트 총 ATP 분석과 달리 경로 기여도 지표를 통해 세포 생물 에너지학을 동적으로 펼쳐 보여주며 다른 세포 분석 기술보다 더 빠르고 심층적인 정보를 제공합니다.
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당분해 경로와 미토콘드리아 경로 모두에서 ATP 생성률을 정량화합니다.
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약물 또는 화합물 투여 후, ATP 생성률의 동역학적 반응을 모니터링합니다.
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Agilent Seahorse XF 실시간 ATP 생성률 실험의 주요 결과. A: 미토콘드리아 호흡에서 당분해로 정량적 대사 이동이 일어나 다양한 조건에서 다양한 표현형이 나타남을 설명합니다. B: 한 세포 집단에서 시간 경과에 따른 mitoATP 생성률과 glycoATP 생성률의 변화를 보여줍니다. 이 같은 측정값을 얻는 방법을 백서를 확인하실 수 있습니다.
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+ 관점의 전환 - 차원이 다른 ATP와 그 측정값
세포 에너지 대사는 세포 표현형과 기능을 발현시키는 구동력입니다. 이 에너지는 당분해 및/또는 미토콘드리아 호흡을 통해 ATP 형태로 생성되며 모든 세포 활동에 필수적입니다. Agilent Seahorse XF 실시간 ATP 생성률 분석을 사용하면 생세포에서 두 경로의 ATP 생성률을 동시에 측정하고 정량화할 수 있습니다. ATP 생성의 동역학적 정량화는 세포 기능을 측정하는 강력하고 새로운 방법을 제공합니다.
+ ATP 생성률 측정 - ATP 레벨 분석 그 이상
엔드포인트 총 ATP 분석을 넘어 ATP 동역학에 대한 관점의 전환
세포 ATP 레벨은 세포가 ATP 생성률의 변화를 통해 ATP 요구량의 변화에 대응할 수 있도록 해주는, 고도로 조절된 시스템에 의해 유지됩니다. 이 시스템은 생리학적 조건에서 일정한 세포 ATP 레벨을 유지합니다. 즉, 총 ATP 레벨을 측정하는 분석은 세포 활동과 에너지 요구량에 대한 동적 정보를 제공하지 않습니다.
ATP 생성을 실시간으로 정량화하면 유전자 변형, 화합물 노출 및/또는 기타 유형의 개입에 대한 반응으로 에너지 대사와 세포 기능 사이의 상호 작용을 더욱 정확하게 평가할 수 있습니다.
A549 세포가 Na+ 이오노포어인 monensin에 노출되었을 때, XF 실시간 ATP 생성률 실험으로 측정한 ATP 생성률은 증가된 Na+ 이온 유입과 그에 따른 Na+/K+ ATPase 활동으로 인해 25% 증가했습니다. A459 세포가 번역 중 펩타이드 신장 억제제인 cycloheximide에 노출되었을 때 ATP 요구량 감소로 인해 ATP 생성률이 약 20% 감소했습니다.
두 경우 모두, 표준 발광 총 ATP 분석으로 측정한 세포 ATP 레벨은 일정했습니다. ATP 생성률을 측정하는 것이 정적 총 세포 ATP 측정보다 세포 기능과 대사의 동역학을 모니터링하는 데 더 유익한 분석법임을 보여주는 결과입니다.
+ 명확한 표현형 얻기 - 이중 ATP 경로 반응 정량화
세포 에너지 대사의 명확한 측정으로 대사 전환과 경로 역할 정량화
대사 전환은 세포 활동에 대한 에너지 요구량을 충족시키기 위해 대체 경로를 사용하여 한 대사 경로의 기능 감소 또는 손실을 보상하는 세포의 능력을 보여주는 현상입니다. Seahorse XF 실시간 ATP 생성률 실험은 관련 미토콘드리아 및 당분해 경로의 생성률과 함께 완전한 세포 에너지 프로파일을 제공하여 연구자가 조절자에 대한 반응으로 대사 전환을 정량화하거나 경로 또는 연료 책임을 밝히는 수단이 됩니다.
MCF7 세포는 정상적인 배양 조건에서 미토콘드리아 호흡을 통해 ATP의 약 70%를 얻습니다. 미토콘드리아 호흡이 조절자 UK5099에 의해 저농도에서 부분적으로 억제되면 이를 보상하기 위해 glycoATP 생성률이 증가합니다. 이 보상의 결과, 세포 활동을 위한 에너지 요구량을 충족시키기 위해 일정한 총 ATP 생성률이 나타납니다.
glycoATP 생성이 세포의 포도당 결핍과 갈락토오스 공급에 의해 억제되면 MCF7 세포는 당분해의 손실을 보상하기 위해 전환하고 mitoATP 생성률을 증가시킵니다.
+ 검증된 방법론에 의존 - 분석 설계 및 XF 보고서 생성기
기술
새로운 Seahorse XF 실시간 ATP 생성률 실험은 XF 기술을 활용하여 미토콘드리아 산소 소비율(OCR)과 당분해성 세포외 산성화율(ECAR)을 측정합니다. 그러면 잘 검증된 알고리즘을 사용하여 이러한 데이터가 mitoATP 및 glycoATP 생성률로 변환됩니다. 이 분석은 에너지 경로 조절제(올리고마이신 및 로테논과 안티마이신 A의 혼합물)의 순차적 주입을 통해 비-ATP 생성 관련 신호의 기여를 배제시킵니다. mitoATP 및 glycoATP 생성률과 총 ATP 생성률은 이렇게 정확한 측정이 가능합니다.
데이터 분석 
Seahorse XF Real-time ATP rate assay report generator는 분석 키트와 함께 제공되는 강력한 데이터 분석 도구입니다. 원시 데이터를 데이터 분석 도구로 가져와 자동으로 처리할 수 있습니다. 최종 데이터는 전문적 그래프와 함께 공유 가능하고 이해하기 쉬운 요약 보고서로 정리됩니다. 그래프의 예에는 누적 막대 차트(A), 에너지 맵(B), XF ATP 생성률 지수(C) 및 ATP 생성률의 운동 추적(총, glycoATP 및 mitoATP)(D)이 포함됩니다.
즉시 연구 활동에서 누릴 수 있는 편익
- Agilent Seahorse 분석기, 모델 XFe96, XF96, XFe24 및 XFp에서 손쉽게 분석 실행
- 사후 분석을 위한 통합 데이터 처리 도구
- 최적화 된 일회용 형식으로 워크플로 및 실험의 간소화
분석 키트 및 구매 옵션 소개
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각종 연구 분야에서 기대되는 효과
면역세포의 에너지 대사는 최근 몇 년 사이 각광을 받으면서 대사 경로와 면역 반응 사이의 긴밀한 연관성을 밝혀내는 역할을 하고 있습니다. 연구자들은 Agilent Seahorse XF 기술을 통해 실시간으로 면역 반응과 조절에서 에너지 대사의 역할을 이해할 수 있습니다.
Seahorse XF 실시간 ATP 생성률 실험을 통해 면역 세포 변조와 Li계통 유지(lineage commitment)를 연구하는 방법을 소개합니다.
세포 대사의 변화는 암의 특징으로 인식되고 있으며 수년 동안 암 연구의 중심에 있었습니다. Agilent Seahorse XF 기술은 당분해와 미토콘드리아 활동의 변화를 실시간으로 측정하여 연구자들이 암세포에서 대사 재프로그래밍이 발생하는 방식과 이유를 이해할 수 있도록 도와 드립니다.
Seahorse XF 실시간 ATP 생성률 실험을 통해 암세포의 대사 표현형을 프로파일링하고 암 거동을 에너지 대사와 연결하는 방법이 있습니다.
차세대 면역 세포 치료를 위해서는 차세대 분석 도구가 필요합니다.
안전하고 강력하며 지속적인 면역 세포 제품은 개발자가 모든 면역 세포 기능(활성화, 증식, 세포 운명, 살해, 면역 조절 및 기억)을 종합적으로 사용하는 것에 달려 있습니다. 이 모든 것이 끊임없이 변화되고 억제되는 독성 종양 미세 환경에서 이루어져야 합니다.
+ 전 세계 기술 지원
미국 및 캐나다
1-800-227-9770; 3번을 선택한 다음 8번 선택
1-800-227-9770; 3번을 선택한 다음 8번 선택
유럽
영국: 0800 096 7632
독일: 0800 180 66 78
네덜란드: 0800 022 7243
기타 유럽 국가: +45 3136 9878
영국: 0800 096 7632
독일: 0800 180 66 78
네덜란드: 0800 022 7243
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