利用双重检测（阻抗和成像）能力监测和测量抗体依赖性细胞毒性
曲妥珠单抗是一种用于治疗乳腺癌和胃癌的单克隆抗体，其主要作用机制之一是通过称为抗体依赖性细胞毒性 (ADCC) 的机制将免疫细胞吸引到 HER2 过表达的肿瘤部位。利用 RTCA eSight 系统实时监测曲妥珠单抗诱导的 ADCC 活性。如多重阻抗和成像所示，SKBR3 靶细胞收缩并经历细胞凋亡，而曲妥珠单抗进一步增强了对 HER2 过表达靶细胞的杀伤能力。
实时 ADCC 检测
实时检测抗体依赖性细胞毒性
抗体依赖性细胞毒性 (ADCC) 又称抗体依赖性细胞介导的细胞毒性，是宿主免疫防御的一种关键机制，其中效应细胞通过特异性抗体所结合的膜表面抗原裂解靶细胞。ADCC 是目前许多单克隆抗体 (mAb) 疗法的基础。ADCC 检测有三个基本成分：效应细胞（即 NK 细胞）、mAb（IgG 类）和肿瘤细胞。当抗体的可变区与靶细胞抗原结合时，其恒定区可同时与 NK 细胞的 Fc 受体 (CD16) 结合。这两种细胞的紧密结合将活化 NK 细胞以释放细胞毒性因子（杀伤靶细胞）。
释放试验是定量分析 ADCC 的常规方法，但是这种方法相当耗时、耗费人力且通量不足 — 而且只能生成终点数据。xCELLigence RTCA eSight 系统提供了一种灵敏、高效的工作流程用于捕获整个杀伤过程；并提供了自动化程度更高、手动操作时间更少的方法，其 ADCC 效力的定量分析更简单，同时增强免疫细胞杀伤作用。
Agilent xCELLigence RTCA eSight 工作流程提供了一种简单的方法，可通过阻抗和活细胞成像（明场加红、绿、蓝荧光通道的组合）测量、定量分析和监测 ADCC 检测的动力学。RTCA eSight 软件工具套装能够生成抗体浓度函数的简单细胞溶解百分比图，通过阻抗和成像生成剂量反应曲线，并在同一孔中进行所有多重分析。与单独的终点分析或活细胞成像相比，实时活细胞多重分析能够提供更多的生物学见解和更丰富的信息。
探索 Agilent xCELLigence 实时细胞分析，了解更全面的实时 ADCC 检测，帮助您实现：
- 通过活细胞成像简单有效地检测 ADCC；利用混合和读取试剂全面测量细胞凋亡和细胞毒性
- 一种连续、多功能的工作流程，能够监测和定量分析癌症靶细胞的生长（标记或无标记），所有操作均在培养箱中进行。
- 在单一或共培养模型中（长达 10 天）能够深度分析细胞和生物学变化，揭示药物功效、细胞溶解百分比曲线和 EC50 值
- ADCC 读数简单，可生成可重现的数据，帮助您在癌症或传染病研究中获得更深入且更有意义的生物学见解。
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通过阻抗和实时成像对增强靶细胞杀伤的程度进行可视化和定量分析
利用成像和阻抗定量分析 ADCC 活性。(A) 对于 HER2 阴性 MDA-MB-231 细胞，eSight 的分割 Mask（黄色轮廓）准确识别了红色靶细胞核，并正确排除了未标记的 PBMC。(B) 红色 MDA-MB-231 细胞核随时间变化的图。在 20 小时时间点增加了不同的处理。误差线表示 3 个重复孔中得到的标准偏差。（C 和 D）与图 A 和图 B 相似，但采用的是 HER2 阳性 SKBR3 细胞。(E) MDA-MB-231 细胞的实时阻抗曲线。(F) SKBR3 细胞的实时阻抗曲线。黑色虚线框出了加入 PBMC 或 PBMC + 曲妥珠单抗后，阻抗立即出现瞬时的增加。
资源
使用 xCELLigence RTCA eSight 测量细胞运动、健康状况及功能
全面介绍了细胞健康状况与活力相关应用，通过在 xCELLigence RTCA eSight 上使用同步细胞阻抗检测和活细胞成像提供多参数实时自动化结果。
活细胞分析最新进展电子书
在一台仪器中，通过同时进行阻抗监测和活细胞成像来捕获细胞数量、形态和粘附能力的细微变化。下载 xCELLigence RTCA eSight 活细胞分析电子书以了解更多信息。
相关应用
仅供科研使用。不用于临床诊断用途。
RA44838.4170601852