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QuikChange HT 蛋白质工程系统详情与规格

概述

 

定点突变 (SDM) 是对蛋白质进行推理性突变,并确保其具有高保真度和目标功能的首选方法。

QuikChange HT 蛋白质工程系统在功能强大的 QuikChange 技术的基础上进行了改进,新添了高保真度的定制寡核苷酸文库。利用 QuikChange HT 推理设计突变体库可快速解决有关结构与功能的问题,其合理的定价使综合突变体库在多方面得到广泛的应用,例如单一氨基酸扫描、点饱和扫描或靶向组合突变。

 

节约研究时间并获取更多信息 — 只需一次实验

图 1. QuikChange HT 方法



QC HT 工作流程包括子库、QuikScan 和 QuikCombine

QuikChange HT 蛋白质工程系统使研究人员能够在一天时间内通过单组寡核苷酸准确靶向并诱变 50 个氨基酸区域内的每个密码子。其他的寡核苷酸组可以在平行反应中诱变多个不同的位点,例如相同或不同蛋白质中的其他 50 个氨基酸区域。

研究人员能够利用该技术通过免费访问突变工作区软件用户界面,由少至 1000 和多达 120000 个用户定义的序列设计长片段突变文库。该文库可包含许多靶向单一蛋白质或多种蛋白质的不同区域的寡核苷酸组(多达 20 个)。各寡核苷酸组对应于与同一基因片段杂交并且序列中有一个或最多四个密码子差异的同源 DNA 序列。每个 DNA 序列含有完全互补的末端,用于对寡核苷酸组进行 PCR 扩增。每个突变文库都针对每个实验进行定制,研究人员可以在收到需求后一天的时间内生成已转化的感受态细胞文库。

图 3. QC HT 方法



验证:GFP 密码子饱和扫描

图 4.GFP 的密码子饱和扫描。GFP 的结构对修饰非常敏感,从只有少量的突变体保留荧光可以说明这一点。β 桶状结构的构象对于蛋白质的取向、成熟和发色团发出的荧光具有重要影响。其他酶(如 β 半乳糖苷酶)则对突变表现出更高的耐受性

仅限研究使用。不可用于诊断目的