疑难杂症，攻克有方 | 分叉拖尾鬼峰，峰形问题看我如何轻松搞定

春光烂漫，百花千姿百态、争奇斗艳，好一幅美景。但如果在液相分析时，色谱峰“千姿百态”、色谱图“千奇百怪”，如色谱峰分叉、拖尾、前延、展宽、出现鬼峰，估计实验员会当场痛哭，苦不堪言。

如何搞定液相峰形问题？在本期文章中，我们将带领大家认识引起峰形问题的可能因素，分享防范妙招及逐步排查建议，助您晋级液相高手。

首先，峰形问题可能来源于以下几点，建议您在实验前重点关注：

良好的色谱柱连接是成功的一半

样品首先会通过色谱柱接头进入色谱柱，看似普普通通的接头，却十分重要，如下图所示：

• 如果深入色谱柱的管线太长，密封圈位置不当，将发生渗漏。
• 如果管线推出的距离不够，将会产生一段死空间，形成混合腔，导致柱外体积，使峰形变坏。
• 如果您使用的是不同厂商的色谱柱，一定要确保使用正确的接头，并保证色谱柱末端接头位置正确。

Agilent InfinityLab 接头采用创新的内置弹簧式设计，可确保零死体积色谱柱连接，助您避免谱峰展宽或拖尾、分离度降低以及由接头连接不良导致的整体色谱性能下降。

表 1. Agilent InfinityLab 接头描述及部件号

如何保证良好的色谱柱性能和寿命？

样品进入色谱柱之后，根据样品中各化合物与固定相及流动相的相互作用强弱来逐步分离出目标物。但经过一段时间的使用，色谱柱很容易受到这些物质的影响发生一些微妙的变化（污染、塌陷），从而出现峰拖尾、展宽、分叉等峰形。

如何才能保证色谱柱柱性能和寿命呢？

• 合理的前处理
• 合理进样体积设置
• 在非极端的条件下使用色谱柱
• 配置在线过滤器或保护柱

在线过滤器

• 通过在线过滤器内部滤芯的孔径过滤来自样品和流动相中的微粒，安装在六通阀6号位或柱前，以确保洁净样品和溶剂进入色谱柱。
• 根据不同仪器耐压情况分别选择 HPLC 和 UHPLC 在线过滤器。

保护柱

• 保护柱的填料：建议与分析柱相同，从而使分析柱的色谱行为不发生改变。
• 保护柱的内径：为保持对样品杂质有足够的容量，应选择内径与色谱柱内径相似的保护柱。
• 何时更换保护柱：理论塔板数、压力或分离度的改变超过10%时，建议更换。

保护柱视频

观看下列视频，详细了解安捷伦保护柱

• 一体式耐高压保护住更换

• 卡套保护住更换

确保液相系统最佳运行也有助于得到良好峰形！

液相预防性维护工具包可以帮助您更好的统一管理液相耗材及建立维护意识，以减少意外故障排查。尤其是进样器中针头和针座钝化导致漏液或样品交叉污染形成鬼峰，转子密封垫凹槽磨损导致进样精密度不准造成重现性差等问题。

推荐使用自动进样器工具包，一次性解决进样器关键性耗材维护，且比单独购买价格更优惠！

表 2. G1313A/G1329 自动进样器工具包（部件号：G1313-68730 ）内含耗材

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