安捷伦 Seahorse XF 分析仪工作原理

自动化实时测量能量代谢

Seahorse XF 分析仪通过测定多孔板中活细胞的耗氧率 (OCR) 和细胞外酸化率 (ECAR) 审查线粒体呼吸和糖酵解等关键细胞功能。XF 分析仪可实时进行化合物添加和混合，免标记分析检测，并自动测定 OCR 和 ECAR。

OCR 和 ECAR 率是线粒体呼吸和糖酵解的关键指标，这些测定可在系统水平了解培养细胞和体外样品的细胞代谢功能。有关选择适合您应用的分析仪的更多信息，请访问我们的 XF 仪器选择指南。

安捷伦 Seahorse XF 分析仪以 5–8 分钟左右的间隔测量耗氧率 (OCR) 和细胞外酸化率 (ECAR)。OCR 是线粒体呼吸作用的指标，而 ECAR 主要由糖酵解产生。

通过隔离微孔板中单层细胞上极少量（约 2 μL）的培养基，实时测量 OCR 和 ECAR。

细胞耗氧量（呼吸）和质子分泌（糖酵解）导致“瞬态微室”中溶解氧和游离质子的浓度发生快速且易测量的变化，可由位于单层细胞上方 200 微米的固态传感器探针每隔数秒进行测量。仪器进行 2–5 分钟的浓度测量，然后分别计算 OCR 和 ECAR。

测量完成后，探针抬起，使得上部更多的培养基可进入并与瞬态微室中的培养基混合，恢复细胞微环境至基线水平。集成的加药系统可以按照用户设置的间隔向每个孔中依次加入多达 4 种化合物。

在开始 XF 分析前，将细胞接种至 XF 细胞培养微孔板的孔中。分析中使用 Seahorse 提供的不含碳酸氢盐的培养基。可将多达四种药物加入分析探针板加药孔中，用于在分析中进行自动加药。首先，将分析探针板置于分析仪中进行光学传感器自动校准。然后，在仪器中插入细胞培养板。

通常，在通过加药口添加抑制剂、激动剂、底物或化合物前，测量三到四次基线（基础）OCR 和 ECAR 率。OCR 以 pmol/min 为单位报告，ECAR 以 mpH/min 为单位报告。然后，将预加载至探针板加药口的化合物按顺序以气动方式加入每孔的培养基中。缓慢混合后，多次测量 OCR 和 ECAR。

Seahorse XF 测量是一种无损测量方法，因此，当在每孔中依次加入四种不同药物时，可重复测量相同细胞群的代谢速率

总分析时间一般为 60 到 90 分钟。完成 XF 分析后，可在同一板上进行其他类型的生物分析，例如细胞活性等。为了保持正常的细胞生理学机能，采用温度控制系统将细胞环境维持在 37 ℃（或其他预设的温度）。

Seahorse 消耗品专用于 Seahorse XF 分析仪。它们可以利用灵敏的动力学测量同时分析两种主要的代谢能量代谢通路：线粒体呼吸和糖酵解。

Seahorse XF FluxPaks 包括探针板、组织培养板、校准液和用于校准的工具板。传感器探针板包含固态传感器探针，用于检测细胞培养基中的氧和质子浓度。它们还配备集成加药口，用于在分析过程中添加激动剂、抑制剂和底物，以便实时监测瞬时细胞反应。XF 组织培养板有 8 孔、24 孔和 96 孔三种规格。细胞培养板专为细胞球体和胰岛而设计。每批 XF Fluxpaks 和培养板都经过了 100% 的质量控制，确保性能和批次之间的一致性。

Seahorse XF 试剂盒、试剂和培养基设计用于使用 XF 分析仪和 XF Fluxpaks 进行多种分析，可实时研究一系列细胞功能，包括代谢表型、ATP 生成、线粒体功能、脂肪酸氧化和糖酵解。它们是经过优化的标准化即开即用式产品，能够获得一致的结果，降低分析的复杂性，提高研究效率。每批产品都用干细胞经过严格测试和验证，可提供高性能和低批间差异。结合安捷伦出色的技术服务，这些试剂盒、试剂和培养基将极大地提高您的 XF 实验效率和体验。