最重要的原因是色谱柱超载。它可能发生在注入色谱柱的一种或多种化合物超出色谱柱液相容量的情况下。液相薄膜越薄，由色谱柱保留的各种化合物越少。其包括进样量以及进样得到的各个色谱峰所对应的浓度。通过减少进样量、分流样品或注入较低浓度的样品可减少体积。