迁移和侵袭是活细胞的关键特性,对正常发育、免疫应答和病理过程(例如癌症转移)至关重要。检查细胞迁移和侵袭的方法对于各种生物医学研究(例如生物医学科学、生物学、生物工程和相关领域)非常有用且十分重要。

划痕实验(也称为划痕汇合实验)是一种体外研究细胞运动的直接且经济的方法。该方法基于以下观察:在创建新的人工间隙时,所谓的“划痕”位于单层融合细胞上。前缘细胞所产生的极性诱导迁移或侵袭(即,在不存在或存在 Matrigel 的情况下)以试图“治愈”模拟伤口。

Agilent AccuWound 划痕工具可在微孔板中生长的单层细胞上制造可重现的划痕;并克服了传统分析方法所面临的挑战,例如通量低、反复的细胞可视化评估、数据主观性强以及重现性不佳。

将 xCELLigence 实时细胞分析仪与全新 AccuWound 96 划痕工具相结合,能够克服上述缺陷,并通过简单的自动化方法彻底改进划痕汇合实验。

此处,我们利用 AccuWound 96 划痕工具在单层细胞中形成一致且可重现的划痕,并使用实时自动成像系统 Agilent xCELLigence RTCA eSight 监测并记录划痕区域的详细的细胞迁移行为。

借助 xCELLigence RTCA eSight 细胞迁移和侵袭分析,您现在可以使用无标记和荧光标记的细胞通过成像来可视化并评估迁移特征、转移潜能、侵袭性表型和划痕闭合率。借助自动化成像功能和软件,可轻松实时跟踪细胞并执行简单、高效的划痕分析 — 所有操作均可在培养箱中进行。

       


显示了 eLenti 红色标记的 HT1080 细胞形态和划痕汇合的差异,使用初始划痕边界和明场 Mask 轮廓在 30 小时内进行跟踪。使用划痕宽度 (um) 作为指标,表明迁移速率大于侵袭速率。此外,与对照相比,100 ng/ml Cyto D 确实对迁移和侵袭速率具有抑制作用。(视频后半部分)存在 3D 胶原凝胶时,HT1080 细胞显示出高侵袭性。 其他划痕汇合指标,包括汇合度、细胞指数、斑点计数和密度,使用自动化软件轻松量化。

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