단일 세포 클론 스크리닝 단일 클론 항체 생산 세포주 최적화, 안정적인 세포주 구축, 유전자 편집 및 약물 표적 스크리닝에 중요한 단계입니다.

이제 xCELLigence RTCA eSight Dilution Cloning 분석을 통해 전체 well 이미징(5배율 대물렌즈)을 사용하여 콜로니를 신속하게 식별하고 단일 클론형성능을 확인할 수 있습니다. 자동화된 이미징 및 소프트웨어를 사용하여 단일 세포에서 파생된 클론을 쉽게 찾아내고 콜로니 형성을 실시간으로 추적할 수 있습니다. 연구자들은 표지 및 비표지 분석법을 사용하여 콜로니 성장을 쉽게 측정하고 클론의 성장 특성(예: 빠른 분열)을 모니터링할 수 있습니다. 노동 집약적이고 오류가 발생할 수 있는 수동 기반 분석법에 의존하는 대신, eSight를 사용하면 인큐베이터 내부에서 관심 있는 클론이 포함된 well을 신속하게 식별할 수 있습니다.

시간 경과에 따른 콜로니의 플레이트 뷰(예: 0일차부터 10일차까지)를 사용하여 eSight는 통찰력 있는 데이터로 단일 클론 세포주를 간단하고 정확하게 스크리닝할 수 있도록 지원합니다. 단일 클론 형성의 추적 및 모니터링은 Dilution Cloning eSight 소프트웨어 모듈과 명시야 및 형광 포커싱을 사용하여 완벽하게 수행할 수 있습니다. 합류 지점 및 개체 카운트 지표를 통해 새로운 콜로니를 정량화할 수 있으며 관심 지점을 기준으로 중지, 리와인딩 또는 앞으로 이동할 수 있는 유연성을 확보할 수 있습니다.

연속적인 10배 희석을 통해 세포 부유액 밀도를 조정합니다.
(파트 1) RTCA eSight 시스템에서 Dilution Cloning 모듈의 명시야 포커싱을 사용하여 단일 클론 형성을 추적 및 모니터링합니다. 대표 이미지는 단일 세포에서 클론에 이르는 전체 성장 과정을 보여주며(인식된 세포는 주황색으로 마스킹됨), eSight 시스템은 단일 세포를 정확하게 인식할 수 있습니다.
(파트 2) 형광 포커싱을 사용하여 수집한 단일 클론 형성 이미지; 빨간색 개체 카운트는 시간의 함수로 표시된 eSight 소프트웨어를 통해 인식됩니다. 라이브셀 분석 결과, 이러한 특정 well에는 (처음부터) 하나의 세포만 존재했으며, 클론 클러스터 성장은 하나의 세포에서 파생된 것으로 나타났습니다.

정량과 데이터 출력에 대한 자세한 내용은 다음에서 추가 자료(문헌)를 참조하세요. Agilent.com/chem/esight